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IIA8小鼠雜交瘤細(xì)胞
貨號(hào):BY-1137
品牌:其它品牌
規(guī)格:T25瓶
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IIA8 小鼠雜交瘤細(xì)胞
IIA8 小鼠雜交瘤細(xì)胞是通過(guò)將小鼠 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)篩選獲得的永生化細(xì)胞系。它整合了 B 淋巴細(xì)胞特異性分泌抗體的功能和骨髓瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性,在單克隆抗體開(kāi)發(fā)、免疫學(xué)機(jī)制研究等方面具有不可替代的作用。
從細(xì)胞特性來(lái)看,IIA8 細(xì)胞呈懸浮生長(zhǎng),在顯微鏡下觀察,細(xì)胞呈規(guī)則圓形,直徑約 10 - 12μm,折光性強(qiáng)。細(xì)胞核大而圓,占據(jù)細(xì)胞約 2/3 的空間,核仁清晰可見(jiàn),細(xì)胞質(zhì)相對(duì)較少,偶見(jiàn)與抗體合成相關(guān)的囊泡結(jié)構(gòu)。通過(guò)免疫表型分析,可檢測(cè)到 CD19、CD22 等 B 細(xì)胞特異性標(biāo)志物的穩(wěn)定表達(dá),證實(shí)其 B 細(xì)胞起源;同時(shí),細(xì)胞染色體數(shù)目接近骨髓瘤細(xì)胞,確保了在體外的持續(xù)增殖能力。
IIA8 細(xì)胞的培養(yǎng)需要特定條件維持活性。常用含 10% - 15% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基,并添加 1% 雙抗(青霉素和鏈霉素)防止污染。細(xì)胞適宜在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)箱中生長(zhǎng),當(dāng)密度達(dá)到
時(shí),需及時(shí)傳代。傳代時(shí),采用離心去除舊培養(yǎng)基后,用新鮮培養(yǎng)基按 1:3 - 1:5 比例重懸接種。凍存時(shí),使用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的凍存液,經(jīng)程序降溫后保存于液氮,可長(zhǎng)期維持細(xì)胞活性。
在科研應(yīng)用上,IIA8 細(xì)胞的核心價(jià)值體現(xiàn)在單克隆抗體制備。通過(guò)免疫小鼠獲取針對(duì)特定抗原的 B 淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞融合篩選出 IIA8 細(xì)胞后,經(jīng)克隆化培養(yǎng),可獲得高特異性單克隆抗體。這些抗體可用于疾病診斷,如開(kāi)發(fā)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒、病原體快速診斷試劑;在基礎(chǔ)研究中,用于解析抗原結(jié)構(gòu)、研究細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路;在治療領(lǐng)域,作為靶向藥物的前體,通過(guò)偶聯(lián)細(xì)胞毒素或放射性核素,實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的精準(zhǔn)殺傷。
IIA8 細(xì)胞系的優(yōu)勢(shì)顯著:其抗體分泌穩(wěn)定,可重復(fù)性高,便于大規(guī)模生產(chǎn);體外培養(yǎng)技術(shù)成熟,操作難度低,適合實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期使用。但也存在局限性:細(xì)胞融合篩選過(guò)程耗時(shí)耗力,且部分細(xì)胞在傳代過(guò)程中可能出現(xiàn)抗體分泌量下降或丟失的現(xiàn)象;小鼠來(lái)源的抗體應(yīng)用于人體時(shí)存在免疫原性,需進(jìn)行人源化改造以降低排斥反應(yīng)。
使用 IIA8 小鼠雜交瘤細(xì)胞時(shí),需定期檢測(cè)細(xì)胞的抗體分泌活性,通過(guò)有限稀釋法篩選高分泌細(xì)胞株;嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范,避免支原體、細(xì)菌污染;控制傳代次數(shù)在 20 代以內(nèi),防止細(xì)胞老化影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。憑借其穩(wěn)定的生物學(xué)特性,IIA8 細(xì)胞將持續(xù)為生物醫(yī)藥研究提供關(guān)鍵技術(shù)支持。