Ehrlich 艾氏腹水瘤瘤株(Ehrlich Ascites Tumor, EAT)是一種經典的小鼠腹水型癌細胞系,起源于小鼠乳腺腺癌,具有高度侵襲性和增殖能力。該瘤株自 1906 年由 Paul Ehrlich **建立以來,已成為腫瘤生物學、藥理學和免疫學研究中常用的模型,尤其在腹水型腫瘤機制、**藥物篩選及免疫治療研究中具有重要價值。
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細胞來源與形態
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源于小鼠乳腺腺癌,可通過腹腔接種在同源或免疫缺陷小鼠(如 BALB/c、ICR 小鼠)體內快速形成腹水瘤。
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腹水瘤細胞呈圓形或卵圓形,懸浮生長,細胞核大且深染,細胞質內可見空泡,分裂相常見,具有典型的癌細胞特征。
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生長與擴散特性
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高增殖率:接種后 1-2 天即可在腹腔內快速增殖,7-10 天達到生長高峰,腹水量顯著增加,癌細胞密度可達 107?108cells/mL。
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侵襲性:除腹腔擴散外,晚期可轉移至肝臟、脾臟等器官,模擬臨床腫瘤的播散過程。
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抗原特性
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表達腫瘤特異性抗原(如 Ehrlich 抗原),可誘導宿主產生免疫應答,但其免疫原性較弱,易逃避免疫監視,適合研究腫瘤免疫逃逸機制。
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體外培養
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可在含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 或 DMEM 培養基中懸浮培養,但體外傳代后增殖能力和生物學特性可能逐漸改變,因此實驗中更常用體內傳代(腹腔接種)維持瘤株活性。
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體內接種
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腹水制備:取對數生長期的腹水瘤細胞,經離心洗滌后,用生理鹽水調整細胞濃度至 106?107cells/mL。
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接種途徑:通過腹腔注射(ip)接種至小鼠體內,通常每只小鼠接種 0.1-0.2 mL 細胞懸液,7-10 天后可收集大量腹水用于實驗。
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**藥物篩選與藥效評估
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腹腔接種 EAT 瘤株后,可通過觀察腹水量、癌細胞計數、小鼠存活時間等指標,快速評估化療藥物(如順鉑、5 - 氟尿嘧啶)或天然化合物的抗腫瘤活性。
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優勢:模型構建簡單、周期短(通常 2-3 周可完成藥效實驗),適合高通量篩選。
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腫瘤免疫機制研究
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用于研究宿主免疫細胞(如 T 細胞、NK 細胞)對腹水瘤的識別與清除機制,或評估免疫佐劑(如卡介苗、細胞因子)的抗腫瘤效果。
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例如,通過敲除免疫相關基因(如 IFN-γ、PD-1)的小鼠模型,分析 EAT 瘤株的生長與免疫逃逸關聯。
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腹水型腫瘤病理機制研究
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模擬臨床惡性腹水的形成過程,研究血管通透性增加、腹腔微環境(如細胞因子、基質成分)對腫瘤擴散的影響。
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可通過檢測腹水中血管內皮生長因子(VEGF)、基質金屬蛋白酶(MMPs)等因子,探討腹水生成的分子機制。
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新型治療技術驗證
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如納米藥物遞送系統、光動力療法、基因治療等在腹水瘤模型中的靶向性與療效評估。
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優勢:
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建模成功率高,小鼠存活率穩定,適合重復性實驗;
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腹水樣本易于獲取,可實時監測腫瘤負荷;
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成本較低,無需特殊設備,適合基礎實驗室使用。
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局限性:
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為小鼠來源腫瘤,與人腫瘤的分子特征存在差異,臨床轉化需謹慎;
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體外培養難度大,長期傳代可能導致基因突變或表型改變;
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免疫原性較弱,在免疫健全小鼠中可能無法完全模擬人類腫瘤的免疫微環境。
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瘤株保存:通過液氮凍存(含 10% DMSO 的胎牛血清)長期保存,避免反復傳代導致細胞特性改變。
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生物**:操作時需注意防護,避免腹水泄漏污染,實驗后廢棄物需按生物危害物處理。
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實驗設計:需設置嚴格對照(如生理鹽水對照組、陽xing藥物對照組),并考慮小鼠品系、性別、年齡對實驗結果的影響。
Ehrlich 艾氏腹水瘤瘤株以其易操作性和穩定的生物學特性,成為腫瘤研究中經典的動物模型。盡管存在種屬差異等局限,但其在基礎機制研究和藥物初篩中仍具有不可替代的價值。隨著基因編輯技術和人源化模型的發展,結合 EAT 瘤株的改良模型(如表達人類腫瘤抗原的轉基因株)將進一步拓展其應用場景,為腫瘤治療提供更精準的研究工具。